ЦЕНТР ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

       
       
     
  


РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ПЕРЕДАЮЩИХСЯ ПОЛОВЫМ ПУТЕМ, У РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП НАСЕЛЕНИЯ Г.ДОНЕЦКА И ОБЛАСТИ

Введение

Материал и методы

Результаты

Обсуждения и выводы

Таблицы:

Литература


Введение

Стремительное развитие цивилизации постепенно меняет облик и содержание многих общественных явлений и постоянно порождает новые проблемы. Показательными в этом смысле являются заболевания, передающиеся половым путём (ЗППП), как явление, имеющее определённое социальное значение. «Сексуальная революция» и широкая практика применения противозачаточных средств, урбанизация и другие социальные, медицинские и демографические факторы способствовали резкому росту числа больных, страдающих ЗППП [1,9].

В настоящее время насчитывается более 20 ЗППП. Они характеризуются высокой контагиозностью и сравнительно быстрым распространением среди определённых групп населения. Ежегодно в мире регистрируется около 200 млн. больных гонореей, 250 млн. – трихомониазом, 250 млн. – хламидиозом, 100 млн. – микоплазмозом [10,15].

По данным VIII Всероссийского съезда дерматовенерологов (г. Москва, июнь, 2001 год) [10], в котором принимали участие специалисты стран ближнего и дальнего зарубежья, заболеваемость ЗППП в странах бывшего СНГ за последние годы выросла более чем на 37 %. В Украине этот показатель  составляет около 1 – 1,5 млн. случаев ЗППП в год [2].

При анализе заболеваемости ЗППП по социальному составу отмечено следующее: основная масса заболеваний выявлена у неработающих – от 39 % до 45 %; уровень заболеваемости среди рабочих – от 14 % до 30 %; среди пенсионеров – 10 %; работников пищевых предприятий и бытового обслуживания – до 7,5 %; учащихся – до 7,9 %; медработников и работников народного образования – поровну, по 2,3 % [16].

Целью настоящей работы явилось изучение распространённости ЗППП у различных групп населения г. Донецка и Донецкой области с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Материал и методы

Исследование проведено у 5428 больных, поступивших на обследование в Центр лабораторной диагностики (ЦЛД) Донецкого государственного медицинского университета в 1999 – 2002 гг. Пациентами были лица мужского и женского пола с признаками воспалительного процесса урогенитального тракта, обратившиеся в клинику и получившие направление в лабораторию для уточнения этиологии воспалительного процесса.

Материалом для исследования служили соскобы из эпителия уретры у мужчин и соскобы эпителия из уретры и цервикального канала у женщин. Соскобы производились одноразовыми стерильными урогенитальными зондами. Материал помещали в 0,3 мл стерильного физиологического раствора в пластиковые пробирки типа «Эппендорф». ПЦР проводили в автоматическом режиме на термоциклере «Терцик МС 202» (НПФ "ДНК-технология", Россия). Реакционные смеси объёмом 20 мкл состояли из буфера, набора нуклеотидтрифосфатов (dNTP), Taq-полимеразы и специфических праймеров – использовали наборы НПФ "ЛИТЕХ" (Россия). После 28-33 циклов амплификации пробы выдерживали в течение 10 мин при +70оС и охлаждали при комнатной температуре. Продукты ПЦР анализировали путем электрофореза в 1,5 % агарозном геле, который проводили согласно стандартным методам с последующим окрашиванием гелей бромистым этидием и сканированием в УФ-трансиллюминаторе "TFX-20.M" ("Vilber Lourmat", Франция).

В рамках данной работы проанализированы архивные данные, хранящиеся в постоянно используемой базе данных «УРАН», разработанной в ЦЛД [17]. Математические данные были подвергнуты статистической обработке с использованием пакета прикладных программ “STADIA. 6.1/prof”, “STATISTIKA”. Для оценки значимости расхождения частот был использован критерий χ2 [14].

Результаты и обсуждение

Несмотря на успехи, достигнутые в диагностике и терапии ЗППП, проблема их эффективной профилактики остаётся актуальной. Велика роль ранней диагностики ЗППП для своевременного лечения, снижающего вероятность осложнений и дальнейшего распространения инфекции. Ведущим методом диагностики при этом является метод ПЦР, использование которого позволяет провести расширенную этиологическую расшифровку ЗППП и выбрать оптимальную тактику терапии. Выбор метода ПЦР обусловлен рядом преимуществ, определяющими из которых являются высокая аналитическая чувствительность и диагностическая специфичность. Предел чувствительности ПЦР при диагностике инфекционных заболеваний (при условии использования 100 мкл клинического образца) составляет от 100 до 1000 возбудителей в 1 мл. Диагностическая специфичность метода ПЦР, определяемая процентом здоровых людей, имеющих истинно отрицательные результаты анализа, оценивается в 99 % - 100 %.

С целью уточнения этиологии ЗППП было обследовано 5428 пациентов (табл. 1). Частота направлений по различным нозологическим единицам составила: на подтверждение диагноза хламидиоз - 60,9 %. Удельный вес анализа составил 34,1 % из общего числа проведённых исследований. При этом диагноз подтвердился в 20,3 % случаев (у 670 лиц из 2638 обследованных).

Второе место по частоте врачебных направлений занимают исследования по идентификации ДНК Ureaplasma urealiticum – 49,2 %. Удельный вес анализа составил 27,6 %. В результате проведения ПЦР–анализа диагноз подтвердился у 38,5 % обследованных (1028 лиц из 1642). Это позволяет утверждать, что у пациентов, направленных на обследование по поводу урогенитальной инфекции, уреаплазмы обнаруживаются чаще, чем хламидии. Высокая частота встречаемости Ureaplasma urealiticum отражает биологию возбудителя и патогенез уреаплазменной инфекции (отличная приспособленность к выживанию в урогенитальном тракте, способность к образованию антибиотико-резистентных форм, слабо выраженный иммунный ответ макроорганизма, высокий процент вялотекущих инфекций при наличии хронического раздражения эпителия нижних отделов половых путей). В этом плане перспективным является серотипирование Ureaplasma urealiticum. Известно 14 серотипов Ureaplasma urealiticum, которые выделяют в два биовара – Parvo и Т–960 [4,12]. Биовары U. Urealiticum имеют различную степень вирулентности: Parvo является патогенным, а Т–960 не патогенным для человека. Следовательно, определение биовара Ureaplasma urealiticum является важным моментом диагностики и выбора тактики лечения уреаплазменной инфекции.

Направление на подтверждение диагноза “гарднереллёз” получили 20,2 % пациентов. Удельный вес анализа составил 11,3 %. Gardnerella vaginalis выделена у 29,4 % обследованных (323 лиц из 776 обследованных).

Частота направлений на идентификацию ДНК Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis примерно одинакова и составляет 15,8 %, 14,8 % и 10,0 % соответственно. Удельный вес анализов составляет: на выделение М. Hominis – 8,8 %, М. Genitalium – 8,3 %, Trichomonas vaginalis – 5,6 %. Mycoplasma hominis обнаружена у 13,8 % обследованных (118 лиц из 737); Mycoplasma genitalium и Trichomonas vaginalis в 8,3 % и 8,1 % случаях соответственно.

На подтверждение диагноза “гонорея” получили направление 7,4 % пациентов. Удельный вес анализа составил 4,2 %. Neisseria gonorrhoeae выделена у 6,4 % больных (26 лиц из 378 обследованных). Низкий уровень обнаружения возбудителя гонореи можно объяснить тем, что направление на обследование получили пациенты со стёртой клинической картиной заболевания и прошедшие курс антибиотикотерапии (постановка ПЦР для контроля качества проведенного лечения).

Сравнительный анализ полученных результатов с данными, полученными в других ПЦР–лабораториях [3,5,16] (табл. 2), показал, что распространённость ЗППП примерно одинакова в различных регионах бывшего СНГ.

Обсуждения и выводы

Несмотря на успехи, достигнутые в диагностике и терапии ЗППП, проблема их эффективной профилактики остаётся актуальной. Велика роль ранней диагностики ЗППП для своевременного лечения, снижающего вероятность осложнений и дальнейшего распространения инфекции. Ведущим методом диагностики при этом является метод ПЦР, использование которого позволяет провести расширенную этиологическую расшифровку ЗППП и выбрать оптимальную тактику терапии. Выбор метода ПЦР обусловлен рядом преимуществ, определяющими из которых являются высокая аналитическая чувствительность и диагностическая специфичность. Предел чувствительности ПЦР при диагностике инфекционных заболеваний (при условии использования 100 мкл клинического образца) составляет от 100 до 1000 возбудителей в 1 мл. Диагностическая специфичность метода ПЦР, определяемая процентом здоровых людей, имеющих истинно отрицательные результаты анализа, оценивается в 99 % - 100 %.

В результате проведённого исследования установлен спектр преобладающих возбудителей (см. табл. 3). Выявлена высокая инфицированность г. Донецка и Донецкой области в первую очередь уреаплазмозом (38,5 %), гарднереллёзом (29, 4 %) и хламидиозом (20,3 %). Высокий уровень уреаплазменной и гарднереллёзной инфекции определяется политропностью возбудителей к различным органам и тканям макроорганизма. Важность проблемы обусловлена чрезвычайно широким их распространением, опасностью не только для заболевшего, но и для его окружения, тяжёлыми осложнениями (хронические воспалительные заболевания органов малого таза, бесплодие, спонтанные аборты, внутриутробная гибель плода).

Также был проведен анализ заболеваемости ЗППП по социальному статусу обследуемых лиц (см. табл. 3). В результате обработки полученных данных выявлено, что количество положительных результатов анализов среди неработающего населения достоверно выше. Так, Mycoplasma hominis выделена у 20,6 % не работающих в сравнении с 12,6 % у работающих (α ≤ 0,05); Ureaplasma urealiticum – у 40,8 % и 38,0 % соответственно (α < 0,05).

При анализе структуры заболеваемости по возрастному составу (таблица 3) превалирующее количество положительных результатов исследования на хламидиоз наблюдается в возрастной категории до 17 лет (35,0 %), на подтверждение диагноза уреаплазмоз – в возрастной категории 17 – 44 лет (39,7%). По выделяемости других видов возбудителей ЗППП лидирующее положение занимают эти же возрастные категории.

Особую тревогу вызывает рост уровня заболеваемости ЗППП среди молодёжи, что указывает на наличие серьёзных проблем в сексуальной сфере у молодых людей, несмотря на то, что в учебных заведениях имеются программы по половому воспитанию, проводятся реализация молодёжных программ городского, областного, международного уровня «Молодёжь против СПИДа», «Молодёжь против наркомании».

При анализе данных лабораторных исследований по половому признаку отмечено, что более высокий процент выявляемости хламидийной инфекции был среди мужчин (36,4 %), среди женщин – 27,7 % (α ≤ 0,05). Это может объясняться тем, что у женщин хламидийная инфекция чаще протекает бессимптомно (но с тяжелыми осложнениями), а у мужчин напротив – остро (острый уретрит, эпидимит), что приводит к ранней обращаемости в клинику и своевременной диагностике [18-20].

Ureaplasma urealiticum (48,8 %) и Gardnerella vaginalis (16,7 %) чаще выделялись у женщин (у мужчин 28,9% и 14,0 % соответственно). Процент положительных анализов Mycoplasma hominis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis у женщин также был выше. Эти данные можно объяснить анатомическими и физиологическими особенностями женской половой системы, которая более восприимчива к инфицированию. По данным [8, 13] женщины в 4 раза более подвержены хроническим воспалительным процессам мочеполовой системы, чем мужчины.

Следует также отметить, что наблюдается тенденция к росту обращаемости (направляемости) пациентов на обследование за анализируемый период. Так, частота направления больных для уточнения диагноза «хламидиоз» в 1999 г. составляла 54,3 %, в 2002 году этот показатель увеличился до 61,7 %. На подтверждение диагноза «уреаплазмоз» в 1999 году обратились 33,3 % пациентов, в 2000 году – 51,1 % , в 2002 г. – 57,1 %.

Эти данные свидетельствуют как об увеличении числа людей, страдающих ЗППП, так и о повышении осознания необходимости диагностики и лечения этих заболеваний. Однако реальный уровень заболеваемости ЗППП значительно выше. Причины этого кроются в первую очередь в недооценке опасности этих заболеваний самими больными, так как часто заболевание протекает бессимптомно.

Значительная часть лечащих врачей при выявлении какого-либо возбудителя ЗППП рекомендует пройти обследование и лечение половому партнеру пациента, так как распространено мнение, что микрофлора половых путей у партнеров идентична. Обнаружение патогенных микроорганизмов только у одного из половых партнёров при не выявлении их у другого считается показателем недостоверности работы лаборатории [6-8,13]. На самом деле практика показывает, что при обследовании сексуальных партнеров в довольно высоком проценте случаев выделяются различные микроорганизмы. Следовательно, для назначения адекватного лечения действия врача должны быть направлены на выявление и обследование всех половых партнеров пациента.

Важным фактором, влияющим на учет количества больных ЗППП, является самолечение, чему способствует свободная продажа антибактериальных препаратов и свободный доступ к информационно-аналитическим материалам, предназначенным для специалистов. Лечение без врачебного контроля способствует повышению устойчивости патогенных микроорганизмов к лекарственным препаратам, переходу острого воспалительного процесса в хронический. Нередко боязнь огласки заставляет пациентов обращаться в частные клиники и лаборатории, где зачастую больным оказывают неквалифицированные медицинские услуги. Не информирование полового партнера или отсутствие у партнера желания пройти обследование и курс лечения также влияет на уровень заболеваемости.

Проблема роста уровня распространенности ЗППП остается актуальной. Можно констатировать, что ЗППП вышли за границы традиционных групп риска (женщины «секс-бизнеса», гомосексуалисты, сексуально активные подростки). Следует также учитывать увеличение числа лиц без определенного места жительства и постоянной работы, недостаточное финансирование бюджетных медицинских учреждений, не всегда адекватные методы диспансерной работы [11].

Таким образом, состояние уровня заболеваемости ЗППП требует внедрения новых форм работы, укрепления лабораторной базы путем организации больших централизованных лабораторий, широкого внедрения современных методов исследования (ПЦР, иммуноферментный анализ), налаживания системы контроля качества, сертификации и высококвалифицированной подготовки специалистов по лабораторной диагностике ЗППП.


Таблица 1. Количество и удельный вес ПЦР-анализов в Центре лабораторной диагностики ДонГМУ с 1999 по 2002 гг.(всего пациентов 5428). 

 

Chl.
Tracho-
matis

Myc. Ho-
minis

Myc. Ge-
nitalis

Ureapl.
Urealyticum

Neisseria gonorrhoeae

Trih. Va-
ginalis

Gardnerella
vaginalis

Количество анализов, абс.

3308

855

806

2670

404

545

1099

Удельный вес анализа, %

34,1

8,8

8,3

27,6

4,2

5,6

11,3

Частота направлений, %

60,9

15,8

14,8

49,2

7,4

10,0

20,2

Отрицательные
результаты:

абс.

(%)

Положительные
результаты:

абс.

 (%)


 

2638

79,7

 
 

670

20,3


 

 737

86,2

 

 
118

13,8

 
 

739

91,7

 

 
67

8,3

 
 

1642

61,5

 

 
1028

38,5


 

 378

93,6

 

 
26

6,4


 

501

91,9

 

 
44

8,1

 
 

776

70,6

 

 
323

29,4
 


Таблица 2. Результаты обследования на ЗППП методом ПЦР в различных лабораториях.

Возбудитель ЗППП

% выявления возбудителя ЗППП в клинических образцах

ЦЛД, государственный медицинский университет, г. Донецк,
Украина

ПЦР-лаборатория, государственная медицинская академия, г.Санкт-Петербург, Россия

ПЦР-лаборатория, медицинский центр «Асклепий»,
г.Владивосток, Россия

Клинико-диагностическая лаборатория,
МСЧ № 170, г. Королев, Россия

Chlamydia
trachomatis

20,3

 

13,6

 

 

15,4

 

20,2

M. Hominis

13,8

13,9

10,6

9,4

M. Genitalis 

8,3

9,4

Нет данных

Нет данных

Ureaplasma
urealyticum

38,5

22,1

18,2

25,4

Trichomonas
vaginalis

8,1

6,3

10,6

Нет данных

Gardnerella
vaginalis

29,4

Нет данных

29,3

42,5


Литература

1.                 Адаскевич В.П. Заболевания, передаваемые половым путём. – 2 изд. - Витебск: Изд –во Витебского медицинского института, 1997. – 310 с.

2.                 Бойцов А.Г., Порин А.А., Белоусова Е.В.и др. Значение ПЦР для диагностики урогенитальных инфекций в практическом здравоохранении // Тез. докл. 3-й Всерос. научн.-практич. конф. «Генодиагностика в современной медицине». - Москва, 2000. С. 22-23.

3.                 Ващенко В.В., Богданов Л.А., Иванец Т.А. и др. Опыт применения метода полимеразной цепной реакции в диагностике заболеваний, передаваемых половым путем во Владивостоке // Там же. – С. 45-47.

4.                 Екимов А.Н., Загребина О.С., Кисина В.И., Говорун В.М. Генотипирование клинических изолятов Ureaplasma urealiticum биовара Parvo // Там же. – С. 73-74.

5.                 Карлина В.П., Сторожук Г.И. Частота выявления бактериальных возбудителей заболеваний мочеполовой системы методом ПЦР // Там же. – С. 29-30.

6.                 Кирилов М.Ю., Спирина Г.В., Пикина А.П.и др. Предварительные испытания ПЦР-тест-системы для полуколичественного определения ДНК Gardnerella vaginalis в клиническом материале //  Там же. – С.  30-32.

7.                 Копылов В.М., Бочкарёв Е.Г., Говорун В.М. и др. Урогенитальный трихомониаз. – М.: Изд-во РМАПО МЗ РФ. – 2001. – 128 с.

8.                 КудрявцеваЛ.В., Ильина Е.Н., Говорун В.М. и др. Бактериальный вагиноз. – М.: Изд-во РМАПО МЗ РФ. – 2001. – 35 с.

9.                 Кудрявцева Л.В., Мисюрина О.Ю., Генерозов Э.В., Говорун В.М. и др. Клиника, диагностика и лечение хламидийной инфекции. – М.: Изд-во РМАПО МЗ РФ. – 2001. – 56 с.

10.            Материалы VIII Всероссийского съезда дерматовенерологов. – Москва, 2001.- 243 с.

11.            Назаренко Г.И., Кишкун А.А. Управление качеством лабораторных исследований. – М.: Медицина, 2001. – 360 с.

12.            Рар В.А., Максимова Т.Г., Смагулова Ф.О. и др. Оценка множественности инфекции эпителиальных клеток человека Ureaplasma urealiticum при использовании ПЦР // Тез. докл. 3-й Всерос. научн.-практич. конф. «Генодиагностика в современной медицине». Москва, 2000. С. - 39-40.

13.            Рищук С.В., Костючек Д.Ф., Бойцов А.Г. и др. Сексуально-трансмиссивные заболевания у половых пар. // Тез. докл. научн. конф. «Современные технологии диагностики и терапии инфекционных болезней».- Москва, 2000. С. 250-151.

14.            Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях. – М.: ГЭОТАР – МЕД, 2001. – 256 с.

15.            Щербо С.Н., Тищенко А.Л. Успехи в диагностике заболеваний, передаваемых половым путём, методом полимеразной цепной реакции. – М.: Изд-во Российского университета Дружбы народов, 1999. –47 с.

16.            Филатов Н.Н., Щербо С.Н., Макаров В.Б. Эпидемиологическое исследование распространённости заболеваний передаваемых половым путём среди населения г. Москвы с использованием метода полимеразной цепной реакции // Тез. докл. 3-й Всерос. научн-практич. конф.  «Генодиагностика в современной медицине». -  Москва, 2000. - С. 50-51.

17.            Уманский В.Я., Зяблицев С.В., Чернобривцев П.А., Пищулина С.В. Использование информационной системы «УРАН» для управления качеством лабораторных исследований // Вестник гигиены и эпидемиологии.- 2002. - Т.6, № 1. -С. 87 – 91.

18.            Everett K.D.E., Andersen A.A. The ribosomal intergenic spacer and domain I of the 23 S rRNA gene are phylogenetic markers for Chlamydia spp // Int. J. Syst. Bacteriol. – 1997. Vol. 47. - P. 461-473.

19.            Everett K.D.E, Bush R.B., Andersen A.A. Emended description of the order Chlamydiales, proposal of Parachlamydiaceae fam.nov. and Simkaniaceae fam.nov., each containing one monotypic genus, revised taxonomy of the family Chlamydiaceae, including a new genus and five species, and standards for the identification organisms // International Journal of Systematic Bacteriology. – 1999. – Vol. 49. - P.415-440.

20.            Garrett A.J. Some properties of the polysaccharide from cell cultures infected with TRIG agent (Chlamydia trachomatis) // J. Gen. Microbiol. – 1975. Vol. 90. - P.133-139.

 


Главная страница > > Публикации > Инфекционные болезни <<<<<<

MEDIC® 1997-2004
Центр лабораторной диагностики